（一）適用范圍

監(jiān)測(cè)消毒液(含氯消毒液、碘制劑、過氧乙酸、戊二醛等)的有效濃度和染菌量情況。

（二）監(jiān)測(cè)時(shí)機(jī)

新配制(購(gòu)進(jìn))的消毒液或使用中的消毒液。

（三）基本方法

1、化學(xué)指示法：使用試紙測(cè)試消毒液的濃度。

2、瓊脂傾注法：實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)消毒液的染菌量。

（四）基本試劑

1、對(duì)于醇類與酚類消毒劑，稀釋液用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯即可；

2、對(duì)于含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒劑，需在肉湯中加入硫代硫酸鈉；

3、對(duì)于洗必泰、季銨鹽類消毒劑，需在肉湯中加入3%（W/V）吐溫80和卵磷脂；

4、對(duì)于醛類消毒劑，需在肉湯中加入甘氨酸；

5、對(duì)于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需在肉湯中加入3%（W/V）吐溫80，以中和被檢樣液的殘效作用。

（五）操作步驟

1、濃度的監(jiān)測(cè)

1）根據(jù)消毒劑的種類，選擇相應(yīng)的濃度測(cè)試紙條。若檢測(cè)戊二醛濃度可選擇戊二醛測(cè)試卡；檢測(cè)含氯制劑和過氧乙酸采用G-1型消毒液濃度試紙。

2）結(jié)果按試紙條說明操作并判斷結(jié)果。

2、染菌量的監(jiān)測(cè)

1）用無(wú)菌移液管吸取使用中消毒液，加入含相應(yīng)中和劑的緩沖液中，充分混勻，作用約10min.

2）再用無(wú)菌吸管分別吸取上述的待檢樣本，置于2個(gè)直徑為90mm的滅菌平皿內(nèi)。

3）加入已熔化的45～48℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂16～18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固。

4）其中一個(gè)平板置于(25±1)℃溫箱培養(yǎng)7日，觀察霉菌生長(zhǎng)情況；另一個(gè)平板置于(36±1)℃溫箱培養(yǎng)72h，記數(shù)菌落數(shù)，必要時(shí)做致病菌(金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌等)的檢測(cè)。

5）計(jì)算公式：

消毒液染菌量(cfu／m1)=每個(gè)平板上的菌落數(shù)×10

3、細(xì)菌種類鑒定

1）從營(yíng)養(yǎng)瓊脂中挑取可疑菌落，根據(jù)實(shí)際情況可選擇血平板、中國(guó)藍(lán)平板、雙S平板、麥康凱平板或各種商用快速篩選平板進(jìn)行細(xì)菌接種。

2）接種后將平板置于(36±1)℃溫箱培養(yǎng)24～48h，挑取可疑菌落進(jìn)行微生物學(xué)鑒定，必要時(shí)做藥敏或分子生物學(xué)分型。

（六）注意事項(xiàng)

1、正確選擇試紙條進(jìn)行檢測(cè)，并注意作用時(shí)間、溫度對(duì)結(jié)果的影響。

2、消毒液染菌量結(jié)果應(yīng)≤100cfu／ml，不得檢出致病菌。

3、必須選擇含相應(yīng)中和劑的稀釋液進(jìn)行采樣，稀釋液與消毒液作用時(shí)間不少于10min。

4、傾注時(shí)瓊脂溫度保持在45～48℃，溫度過高可致細(xì)菌死亡，過低則影響傾注效果。

5、含碘消毒劑目前無(wú)濃度檢測(cè)試紙(卡)，不能常規(guī)檢測(cè)。